Blood sample collection in small laboratory animals
Journal of Pharmacology & Pharmacotherapeutics (2010) 1(2) / DOI: 10.4103/0976-500X.72350
Parasuraman S, Raveendran R, Kesavan R
Article type: Methods
선택이유: 동물 실험 중에 혈액을 수집할 때 참고하기 위함
- 혈액 채취를 할 때 동물에 최소한의 스트레스를 주어야 한다. 그렇지 않으면 실험 결과에 영향을 미치기 때문이다.
GENERAL PRINCIPLES OF BLOOD COLLECTION IN ANIMALS
- 혈액 채취 방법은 반드시 Protocol에 포함되어 있어야 하며 Institute animal ethics committee에 의해 허가받아야 한다.
- 최소한의 스트레스와 고통을 주어야 한다. 혈액 채취는 마취를 진행하거나 하지 않는 상황에서 이뤄져야 한다.
- 채취할 종과 채취 방법에 대한 적절한 훈련이 이뤄져야 한다.
- 보통 혈액 채취는 venous (정맥), arterial vessel (동맥 도관), heart chamber (심실) 에서 진행한다.
- 다중 채혈일 경우 토끼목 (hare, rabbit)을 사용할 수 있고, 비설치류일 경우에는 2주에 한 번 진행하는 것이 좋다.
- 실험 중 채혈은 (nonterminal blood collection) 건강한 정상 성체를 기준으로 한 번 채혈 시 총 혈액의 10% 까지가 한계이다. 3~4주 후에 재 채혈이 가능하다. 짧은 시간 간격으로 채혈할 때에는 최대 0.6 mL/kg/day 또는 동물 총 혈액량의 1.0%를 매 24시간 마다 채혈할 수 있다.
- 반복 채혈일 경우에는 임시로 cannula를 통해 채혈하는 것이 고통을 줄여준다.
- 총 혈액량을 예상할 때에는 성체를 기준으로 55~70 mL/kg body weight 으로 계산한다. 10% 이상 채혈시에는 fluid replacement가 필요하며 Lactated Ringer's solution (LRS)를 사용하는 것이 NIH 권고안이다. 30% 이상 채혈시에는 체액 감소로 인해 고통받지 않도록 적절한 조치가 취해져야 한다.
GENERAL METHODS FOR BLOOD COLLECTION
- Blood collection not requiring anesthesia
Saphenous vein (rat, mice, guinea pig)
Dorsal pedal vein (rat, mice) - Blood collection requiring anesthesia (local/general anesthesia)
Tail vein (rat, mice)
Tail snip (mice)
Orbital sinus (rat, mice)
Jugular vein (rat, mice)
Temporary cannula (rat, mice)
Blood vessel cannulation (rat, guinea pig, ferret)
Tarsal vein (guinea pig)
Marginal ear vein/artery (rabbit) - Terminal procedure
Cardiac puncture (rat, mice, guinea pig, rabbit, ferret)
Orbital sinus (rat, mice)
Posterior vena cava (rat, mice)
PROCEDURE FOR JUGULAR VEIN BLOOD SAMPLE COLLECTION
필요 물품: animal, anesthetic agent, cotton, 25G needle, blood sample collection tubes
- 이 방법은 일반적인 흡입 마취 방법으로 수행되며 채혈에 두 사람이 필요하다.
- 한 사람은 동물을 잡고 모니터링하며, 다른 사람은 혈액을 채취한다.
- 동물의 목 부위를 제모하고, hyperextended position을 유지한다.
- Jugular vein (중심 정맥관)은 푸른색을 띄며 2~4 mm 측면의 흉쇄골 연접부에서 보인다.
- 25G 바늘은 뒤에서 앞 방향 (caudocephalic direction)으로 삽입하고 채혈은 작은 혈관들을 건드리지 않도록하며 서서히 한다. 동물은 조심스럽게 다루며, 바늘은 혈관에 3~4mm 이상 삽입되지 않게 한다.
- 첫 시도에서 실패한다면, 바늘을 서서히 제거하고 출혈을 확인한다. 만약 출혈이 없다면 재시도한다. 출혈이 있다면 더 이상의 시도는 하지 않는다.
※주의사항:
- 채혈 시도는 3번까지만 수행하는 것으로 제한된다.
- 샘플링 전 30분간 국소 마취 크림을 바른다.
용어 설명
Lagomorph: 토끼목(目) 포유동물의 총
Cannula: 캐뉼라(체내로 약물을 주입하거나 체액을 뽑아내기 위해 꽂는 관)
Hypovolemia: 체액감소
Jugular vein: 중심 정맥관
Caudocephalic direction (back to front): 꼬리 부분에서 머리 부분으로 향하는 방향
Sternoclavicular junction: 흉쇄골 연접부